RESUMENES DE LAS COMUNICACIONES ORALES

ENDOCRINOLOGIA III - ENDOCRINOLOGIA Y METABOLISMO

Coordinadores: M Pisarev, G Levin

95. La tiroxina per se activa la termogenesis de la grasa parda en el frío. AA Zaninovich, IR Miglione, M Raices, M Pavía, K Hagmüller
Hospital de Clínicas Jose de San Martín e INGEBI, Buenos Aires; Departamento de Zoología, Universidad de Graz, Austria

El aumento de la proteína desacoplante (UCP) del BAT en el frío, es promovido por la noradrenalina y la T3. El presente trabajo estudió si el boqueo de la conversión de T4 a T3 (considerada imprescindible para algunos autores) alteró el “binding” del GDP a la UCP, que es un índice de termogenesis activada. Se usaron ratas hipotiroideas tratadas con T4 (grupo control), T4 mas ácido iopanoico, que bloquea la conversión de T4 T3 (grupo T4/IOP) o T3. Se midió el binding del GDP en mitocondria de BAT usando (3H)GDP y ecuación de Scatchard. Grupo control: el binding fue de 242±24 pg/mg prot. luego de 24 h en el frío y 403±25 pg luego de 10 días a 4ºC. Grupo T4/IOP: Los valores fueron 175±23 pg/mg prot. y 389±45 pg/mg prot. respectivamente. Grupo T3: El binding fue de 125±23 pg/mg prot. y 186±18 pg/mg prot. respectivamente. La mitad las ratas tratadas con T3 murieron de hipotermia por insuficiente activación del BAT. La T4 per se puede activar la síntesis de UCP, aunque normalmente debe deiodinarse a T3 para realizar esa función.

96. Aporte yodado y autoinmunidad tiroidea durante el embarazo. V Namer, M Torres, DH Sánchez, S Quiroga, L Díaz, A Florín
C.E.M.I.C. y Cátedra de Química Analítica Instrumental, Universidad de Buenos Aires

Objetivo: Determinar el aporte yodado, la función tiroidea y la prevalencia de la auto-inmunidad tiroidea en la mujer embarazada en la ciudad de Buenos Aires. Metodología: Se constituyeron tres grupos: control (mujeres no embarazadas) n=15, primer trimestre de embarazo n=14 y tercer trimestre de embarazo n=17, en los cuales se efectuaron los siguientes análisis: dosaje de yodo en orina de 24 horas por método potenciométrico, determinación cuantitativa de la TSH sérica y de la T4 libre por ELISA (Enzymutest TSH Boehringer y enzymun-test FT4 Boehringer respectivamente) y dosaje de los anticuerpos anti-tiroperoxidasa (anti-TPO) y anticuerpos anti-tiroglobulina (anti-Tg) por método directo (RSR). Resultados: El aporte yodado promedio fue de 740mg/día (VN: 150 a 300mg/día), en los tres grupos. Los valores de la TSH y de la T4 libre se encontraron en el rango normal en todos los grupos. La presencia de anticuerpos antitiroideos (anti-Tg y/o anti- TPO) se encontró en el 18% de los sujetos. Conclusión: Dado la fuerte prevalencia de auto-inmunidad tiroidea en esta población, probablemente favorecida por un elevado aporte yodado, se sugiere un estudio longitudinal y una búsqueda de auto-inmunidad tiroidea sistemática en la mujer embarazada ya que la presencia de anticuerpos es orientadora de patología tiroidea y obstétrica.

97. Caracterización de tirosina fosfatasas acth-dependientes en zona fasciculata de adrenal de rata. Fabiana Cornejo Maciel, Cristina Paz, EJ Podestá
Departamento de Bioquímica, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires

En trabajos previos hemos demostrado la participación obligatoria de fosfatasas sensibles a vanadato, regulables via proteína quinasa A, en el mecanismo de activación de la esteroidogénesis por ACTH y LH. El presente estudio estuvo dirigido a caracterizar parcialmente la(s) tirosina fosfatasa(s) involucrada(s) en dicho mecanismo. Para ello se utilizó un ensayo de tirosina fosfatasa que permite la caracterización molecular simultáneamente con la medición de la actividad hormono dependiente. Se marcó poli-Glutámico-Tirosina (pGT) con [32P]ATP utilizando receptor de EGF e insulina como tirosina quinasas (purificados, fuente comercial). Se realizó el cross-linking del sustrato marcado en tirosina con acrilamida para ser utilizado en SDS-PAGE. Las proteínas citosólicas de ZF de adrenal de rata se separaron por electroforesis y la actividad de tirosina fosfatasas se evidenció en el mismo gel por autorradiografía. La desfosforilación del pGT se observó como regiones donde el 32P ha sido selectivamente removido. Con esta metodología se detectó la presencia de tres isoformas de masa molecular 50, 80 y 110 kDa. ACTH (1 nM) incrementó la actividad de las tres isoformas. Ninguna de ellas corresponde a la PTP1D, que se regula por cAMP-PKA. Estos resultados demuestran la existencia de más de una isoforma de PTP involucrada en el mecanismo de acción de ACTH.

98. Caracterización de los sustratos endógenos de tirosina fosfatasas ACTH-dependientes en zona fasciculata de adrenal de rata. Cristina Paz, Fabiana Cornejo Maciel, Cecilia Poderoso, EJ Podestá
Departamento de Bioquímica, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires

Previamente demostramos que las proteínas tirosina-fosfatasas (PTPs) participan en la activación hormonal de la esteroidogénesis y que, en zona fasciculata (ZF) de adrenal, ACTH incrementa la actividad de fosfatasas sensible a vanadato, lo cual sugiere la existencia de PTPs y fosfotirosina proteína(s) (pTp) que regulan la esteroidogénesis adrenal. El objetivo del presente estudio fue identificar los sustratos endógenos de la PTPs involucradas en dicho mecanismo. Para ello se monitoreó la actividad de fosfatasas utilizando un sustrato específicamente fosforilado en tirosina (RCM-[32P]lisozima) y paralelamente la defosforilación endógena por Western blot con anticuerpos anti-P-tirosina. La administración de ACTH incrementó rápidamente la actividad de PTPs medida con RCM-[32P]lisozima: fue significativamente superior al control luego de 5’ de estimulación (control 36,8±0,5 vs ACTH 43,7±0,4 mU/mg proteína, p<0,05) y alcanzó un máximo a los 15’. 8BrcAMP produce el mismo efecto. El análisis de los sustratos endógenos reveló la defosforilación específica de dos proteínas de masa molecular 120 y 55 kDa en microsomas y una de 55 kDa en citosol. La activación de PTPs correlacionó con la defosforilación de sustratos endógenos. Estos resultados indican que ACTH y cAMP producen una rápida activación de PTPs y que por lo menos 3 pTp estarían involucradas en el mecanismo de acción de ACTH.

99. Efectos óseos del olpadronato (OPD) descriptos por variación del umbral de atenuación tomográfica (pQCT). M Parma, P Schneider, M Braun, E Piccinni, Nélida Mondelo, JL Ferretti
Gador, Buenos Aires; CEMFoC, UNR, Rosario; Universidad de Würzburg, Alemania.

Analizamos por pQCT las metáfisis femorales de ratones BALB/c, normales o hipercalcémicos por transplante de tumor PO7 (Instituto Roffo), sin otro tratamiento (N, T) o tratados con 1 ó 3 mg/kg/d sc de OPD desde el implante (T+OPD), ú 8.4 mg/kg/3d (N+OPD) por 28 d (n=6-8/grupo). Como la condensación del trabecular por OPD impidió su distinción del cortical, analizamos la distribución de valores de área ósea y contenido o densidad mineral volumétricos variando el umbral de atenuación del aparato (UA) dentro de todo el rango disponible. Las pérdidas (T) o ganancias de masa ósea (OPD) predominaron a UA = 0.7 cm-1 en N y T, y a 0.9 cm-1 en N+OPD y T+OPD, indicando que a) el tumor redujo la masa ósea (p<0.001) y volvió indetectable al hueso cortical, y b) el OPD protegió al hueso trabecular contra la remodelación hasta hacerlo igual ó más denso que el cortical normal para la especie. Proponemos la novedosa técnica empleada para la investigación esquelética.

100. Distinción Biomecánica Práctica Entre Osteopenias Y Osteoporosis. J L Ferretti , R Capozza, G Cointry, JR Zanchetta, HM Frost.
CEMFoC, UNR, Rosario; IDIM/FIM, Buenos Aires; S.Colorado Clinic, Pueblo, USA

Proponemos 2 mecanismos etiopatogénicos para las osteo-patías fragilizantes: la descarga mecánica (osteopenia por desuso) y el corrimiento del setpoint del mecanostato óseo (fragilidad ósea «sintomática»). Desarrollamos al efecto 2 curvas de referencia (n=1450, 100) que permiten: 1) una cuantificación densitométrica de la osteopenia referida a la masa muscular regional para cada sexo y estado reproductivo, y 2) una evaluación tomográfica de la calidad mecánica ósea referida a la fuerza (o área seccional) muscular regional, independiente del sexo. Sus intervalos fiduciales determinan escalas de z-scores para masa y calidad mecánica ósea sobre ejes individuales verticales, posicionados en las abscisas según la masa y la fuerza o la sec-ción muscular. Distinguimos así: a) osteopenias simples, sin compromiso biomecánico; b) osteopatías fragilizantes no-osteopénicas, y c) osteopatías fragilizantes osteopénicas («osteoporosis»). Esto aventaja al diagnóstico densitométrico por t-scores de masa ósea carentes de correlato biomecánico, que confunde osteopenias con osteoporosis.