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RESUMENES DE LAS COMUNICACIONES ORALES
INMUNOLOGIA II - INMUNOLOGIA CLINICA Coordinadores: A Casellas, A Almará 107. La cirugía endoluminal de aneurisma de aorta abdominal
(AAA) normaliza más rapidamente los niveles de IL1-ra que la cirugía
convencional. M Ferreira, M Cecilia Fornari, Sandra A Espósito, RA
Diez, JC Parodi. El IL-1ra es un contrarregulador endógeno de la actividad proinflamatoria que contribuye a restaurar la homeostasis tras la injuria. Para evaluar el impacto proinflamatorio de las técnicas endoluminal y convencional de resección de AAA, estudiamos mediante ELISA (R&D Systems), prospectivamente, los niveles séricos (en pg/mL) de IL-1ra en 16 pacientes (13 varones, edad 55 a 75 años) sometidos a cirugía de endoluminal (n=12) o convencional (n=4). Pre-cirugía no existía diferencia (1178 ± 126 vs 1052 ± 240, ambos dentro del rango normal), aumentó post-cirugía (hasta 2713 y 3413 respectivamente, incrementos de 1535 ± 341 y 2365 ± 755, p=NS entre ellos), seguía elevada a las 24 h (p=NS) pero a las 48 h el grupo endoluminal ya estaba mucho más cerca de su basal mientras el convencional seguía muy aumentando (1490 y 2891, incrementos de 312 ± 221 vs 1739 ± 836, p < 0,05). A las 72 h, los niveles de IL-1ra eran todavía superiores al basal, sin diferencia entre ambos grupos (1498 y 1813, 320 ± 147 vs 751 ± 210 sobre el basal). Probablemte esta diferencia refleja la menor injuria de la técnica endoluminal.
108. Detección de apoptosis temprana y tardía en leucocitos
sanguíneos de pacientes con infección por HIV-1. M. Teresa Guereño,
M Cecilia Fornari, M. Arantxa Goicoa, RA Diez. La inmunodeficiencia inducida por HIV-1 resulta de la depleción linfoide por apoptosis. En este trabajo evaluamos apoptosis temprana y tardía en leucocitos de sangre periférica de pacientes infectados con HIV-1 en tratamiento (n=5, varones, CD4 entre 323 y 555 cél./mm3). Se empleó detección simultánea de apoptosis temprana y tardía (Belloc et al. Cytometry 17:59, 1994), en base a captación de HOE 33342 e yoduro de propidio (IP, para marcar ADN). Se incubaron 100 µl de sangre, a 37º durante 1 min. con HOE 33342 1 mg/mL y se transfirió a 4ºC agregando 50 µg/mL de IP. Los eritrocitos fueron lisados con FACS Lysing solutionNR. Se adquirió de inmediato en un citómetro FACSsort. Se definieron ventanas de FSS y SSC para PMN, linfocitos y monocitos. La mayoría de los linfocitos presentaba marcación con HOE 33342 (76,35 ± 2,91% de las células), siendo mucho menor la fracción de PMN o monocitos (1,82 ± 0,40% y 11,89 ± 2,81 % respectivamente). La fracción con IP fue baja en todos los tipos celulares (7,11 ± 1,06; 0,61 ± 0,15 y 5,28 ± 0,73%, en el mismo orden). Preliminarmente, estos datos sugieren que la fracción de linfocitos comprometidos en apoptosis es muy superior a lo previamente estimado.
109. Genotipificación del virus de Epstein Barr (EBV) aislado
de líneas celulares obtenidas de cultivos de células mononucleares
periféricas (PBMC) de pacientes hemofílicos infectados con el virus
de la inmuno deficiencia humana (HIV). P Baré, G Mendez, R Pérez
Bianco, MM Bracco, B Ruibal Ares Se obtuvieron líneas celulares de cultivos de PBMC de pacientes hemofílicos HIV positivos. Se genotipificó el EVB que provoca esta transformación como resultado de la expresión de sus genes de latencia.Se caracterizó por PCR el gen de la proteína EBNA 2 que distingue los dos tipos circulantes en la población (EBV-1, EBV-2) y además se estudió la existencia de una deleción de 30 pares de bases en el gen de la proteína LMP1, identificada en linfomas de Hodgkin. Se estudiaron 21 líneas de pacientes HIV positivos y 6 dadores normales. Sólo una de las 21 líneas de hemofílicos resultó ser EBV- 2 y 7 presentaron la deleción mencionada en el gen de la LMP 1. De la población control, 2 presentaron la deleción, perteneciendo todos al EBV -1. Se plantea la necesidad de establecer la prevalencia del genotipo viral en población normal argentina para poder sacar conclusiones acerca de los datos obtenidos en nuestra población hemofílica estudiada
110. La prolactina (PRL) humana disminuye el estallido
respiratorio de neutrófilos (PMN) normales, medido por citometría de
flujo. M Cecilia Fornari, María E D’Alessandro, M Teresa Guereño,
AD Intebi, RA Diez. Para determinar el efecto de la PRL sobre el estallido respiratorio de PMN normales mediante citometría de flujo (con citómetro FACSsort, BD), empleando un equipo estandarizado (Burst-test, Orpegen Pharma, Alemania). El método se basa en la oxidación de rodamina 123 por los radicales generados durante el estallido. Se estudió sangre entera heparinizada de 11 sujetos normales, incubada 1 h a 37ºC con 100 ng/mL PRL humana superpura (human PRL-SIAFP-B-2, NIDDK, NIH, EEUU). Se construyó una ventana para PMN en base a características morfológicas (FSC y SSC) y viabilidad (basada en contenido de ADN, medido con yoduro de propidio en FL2). Se evaluó el corrimiento de fluorescencia promedio en FL1. Sin estimulación no existía actividad (10 ± 3 UAF), similar con o sin PRL. El desafío con PMA (8 µM, 10 min.) indujo un significativo aumento (a 508 ± 91 UAF, p< 0,001), el cual se inhibió por efecto de la prolactina (66 ± 18 UAF, p=0,002 por ANOVA). Dado que esta concentración es encontrable en humanos, se requieren estudios adicionales con pacientes para determinar su relevancia clínica
111. Utilidad de la detección conjunta de anticuerpos anti-GAD
(GADA) y anti-ICA512 (ICA512AA) en el diagnóstico de diferentes
formas de diabetes. M Sica1, S Valdez1, V Labovsky1, A Krochik2, C
Mazza C2, N Cédola3, E Poskus1. Nuestro objetivo fue evaluar la utilidad de la detección conjunta
de GADA y ICA512AA en el diagnóstico de diferentes formas de
diabetes. Ambos se detectaron individual y conjuntamente por
radioinmunoprecipitación. Se detectó IAA por unión radioligando. Se
estudiaron 71 pacientes diabéticos tipo 1 (DMID) debutantes, 42 con
DM tipo 2 requirientes de insulina antes de los 2 años del
diagnóstico (DM1), 30 con DM tipo 2 que requirieron insulina luego de
10 años del diagnósitco (DM2I), 64 con DM tipo 2 (DM2) y 30
controles normales. Los resultados obtenidos fueron: IAA ICA512AA GADA ³ 2 marc. ninguno DMID 36.6% 66.3% 71.9% 60.6% 12% La detección conjunta de GADA e ICA512AA juntcon la de IAA es una herramienta útil en programas de predicción y prevención de las formas de diabetes infantil y de adultos jóvenes.
112. Modulación de la reparación de quemaduras por
inflamación y contrairritación. JA Genovese1, Victoria de los
Ángeles Bustuoabad, R Meiss, P di Gianni y OD Bustuoabad La quemadura cutánea desencadena un fenómeno cicatrizal que se inicia con el depósito de fibrina, células, y mediadores solubles (escara primaria,EP), y culmina con la epitelización sobre un lecho fibroso(escara secundaria,ES). El objetivo del trabajo fue demostrar que dichos fenómenos dependen de un equilibrio entre inflamación y contrairritación. Un área circular de 0.5mm, de piel del dorso, fue quemada bajo anestesia en tres grupos de ratones BALB/c: a) control; b) inflamación perilesional con turpentina; c) inflamación a distancia. Al día 14 9/9 ratones del grupo b mostraban caída de la EP contra 6/9 del grupo a y 2/9 del grupo c. La ES tuvo similar evolución. En otro experimento 24 ratones fueron quemados recibiendo 12 indometacina (0.001 mg/g). Estos últimos mostraron un retraso de la caída de ambas escaras (2/12 para la EP y 6/12 para la ES mientras en el control era 12/12, en los días 14 y 20). La exacerbación de la inflamación perilesional estimula la cicatrización, mientras que su reducción, por anti-inflamatorios, o por el incremento de la contrairritación por inflamación a distancia, la retarda.
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