RESUMENES DE LAS COMUNICACIONES ORALES

TUMORES I - ANGIOGENESIS Y DISEMINACION TUMORAL

Coordinadores: E Bal, L Davel

29. Elastosis estromal y metastasis en ganglios linfàticos axilares en carcinomas de mama. L. Wernicke, L. Piñeyro, M Telenta
Hospital Italiano ,Buenos Aires

La elastosis estromal (ES) del carcinoma de mama se ha asociado a buen pronostico. Investigamos la presencia ES en el estroma de carcinomas mamarios cuantificándola en tres grados (leve, moderada y franca) y estudiamos su correlacion con la presencia de metástasis en ganglios linfáticos axilares. Se evaluaron cortes histologicos de rutina en 806 casos consecutivos subdivididos por tamaño: T1b (n=112 casos): 59 con elastosis leve, de los cuales 15 ( 24% ) presentaron axila positiva (AP), 30 con ES moderada: 1 caso (3,3%) con AP y 23 con ES franca,1 caso con AP (4,3%) (Fisher p<0.006). En los T1c (n=357) y en los T2 (n=337) no hubo correlación entre ES y AP. Se tomaron 366 casos con AP (n total=806 ) evaluándose la presencia de ES en relación al número de ganglios positivos: 307 casos con ES leve o moderada presentaron una media de 2 ganglios positivos y 59 con ES franca mostraron una media de 1 ganglio positivo ( p<0.01Mann Withney). Se realizó ademáss un análisis de múltiples variables histològicas por test de regresión logística en 682 casos con datos completos (del n total = 806). La elastosis se asoció positivamente con la presencia de bordes infiltrativos ( p<0.000), a la desmoplasia (p<0.0000) y edad postmenopáusica ( p< 0.01) y negativamente al tipo tumoral ( p< 0.0000) y al número de metástasis axilares ( p<0.02). No se halló asociación entre elastosis y presencia de axila positiva. Conclusion: La elastosis podria se un indicador de enlentecimiento del proceso invasivo y de la generación de metástasis axilares.

30. Generación de angiostatina por células cancerosas y resistencia antitumoral concomitante. M. Mercedes Binda, Alejandro D. González, Alejandra L. Boquete, R. Daniel Bonfil
Fundación de Investigación del Cáncer, CEFYBO, Buenos Aires

Previamente se ha demostrado que la inhibición de tumores secundarios en huéspedes en los que existe un tumor previo (resistencia antitumoral concomitante o RC) se debería a un fenómeno antiangiogénico. Utilizando las líneas de cáncer de pulmón humanas Calu-6 y H460, y la de mama murina M3MC hemos analizado la RC en ratones nude y BALB/c, respectivamente. Se verificó una reducción del volumen tumoral secundario respecto del control de 80% (Calu-6), -2% (H-460) y 83% (M3MC), 24 días después de inocular las células tumorales en segunda instancia en grupos de 4 a 6 ratones. Los medios condicionados in vitro por esas mismas líneas se coincubaron por 24 hrs con plasminógeno y, luego, la expresión de angiostatina (PM@38 kD) se analizó por Western Blot utilizando un anticuerpo monoclonal anti-kringles 1-3 del plasminógeno. Mientras que las líneas inductoras de RC generaron angiostatina a partir del plasminógeno, la línea H460 fue incapaz de hacerlo. En base a los resultados se destaca el probable rol de la angiostatina en la RC. (Investigación subsidiada por la Fundación Alberto J. Roemmers)

31. Los cambios mixoides estromales tienen un valor pronóstico por posible intervención en el proceso metastático del cáncer de mama. Parte I. M Wernicke, Laura Piñeiro, Daniela Caramuti, Vanesa Dorn
Hospital Italiano, Buenos Aires

Los cambios mixoides (CM) observados en el estroma de los carcinomas de mama tienen entre sus componentes al ácido hialurónico, mucopolisacárido que se asocia a la capacidad metastásica de los carcinomas. Se estudiaron los CM en 1053 carcinomas de mama, la evalución fue semicuantitativa a doble ciego en cortes teñidos con Hematoxilina-eosina e inmuno-marcaciòn con la b-PG for Hyaluronan ( proteoglicano que colorea ácido hialurónico). Se realizó conteo de focos de CM con los siguientes resultados: < 2 focos= débiles, 2 a 4 focos = moderados y > 4 focos = francos. La serie se subdividió en dos grupos de pacientes con los siguientes resultados:
a) 753 casos consecutivos sin estudio pronóstico : 279 con CM debiles y 81 con axila positiva (AP) (27%), 239 con CM moderados y 111 con AP (46%) y 235 con CM francos y 155 con AP (66%) (x=81.5), Fisher: p:<0.00000). En el estudio de re-gresión logística los CM se asocian positivamente a AP (p<0.000000), al margen tumoral (p<0.000000), a las embo-lizaciones linfáticas (p<0.00008) y negativamente a la desmoplasia (p<0.009) y a la edad (p<0.02). b) 300 casos estudio pronóstico y axila negativa (AN) con seguimiento de 10 años: 195 con CM débiles y 7 muertes (3.5%) contra 105 con CM francos y 10 muertes (9,5%) (Log Rank: p<0.02). Conclusión: Los estudios realizados nos permiten concluir que los cambios mixoides del estroma tumoral en el carcinoma de mama se asocian:1) muy significativamente a la presencia de metástasis en ganglios axilares y 2) débilmente a la sobrevida de los pacientes.

32. Regulación de la angiogénesis y progresión tumoral por óxido nítrico (NO). Lilia Davel, Ana Eiján, H. Rueda, María A. Jasnis
Instituto de Oncología A.H.Roffo, Facultad de Medicina, UBA

El NO puede tener un efecto estimulatorio o inhibitorio en el desarrollo tumoral. Nuestro objetivo fue estudiar la modulación por NO de la angiogénesis y progresión de un adenocarcinoma mamario murino (S13). Ratones BALB/c se inocularon con células S13 en flanco o en la almohadilla plantar y se trataron con 1g/l de L-Arg (A) o de L-NAME (N), vía oral, durante toda la evolución tumoral (20-25 días). Se evaluó el crecimiento del tumor, la incidencia y el número de metástasis pulmonares. El tratamiento con N disminuyó significativamente el tamaño tumoral (flanco: 22,54 ± 2,91 vs 17,43 ± 2,04 mm; p<0,01 y pata: 1,81 ± 0,2 vs 1,65 ± 0,08 mm; p<0,05; Control vs N), la incidencia y el número de metástasis. En los ratones portadores, los ganglios drenantes (axilar y poplíteo) aumentaron de tamaño, producto de una histiocitosis sin evidencia de metástasis y el N redujo significati-vamente su tamaño; cuando éstas células se coinocularon con células S13 (100:1) inhibieron el crecimiento del tumor comparado con células de ganglio de portadores tratados con A: 2,20 ± 0,25 vs 2,71 ± 0,51 mm; p<0,05. El tratamiento con N de ratones normales receptores de células S13, bloqueó la respuesta angiogénica (p<0,01). Concluimos que NO facilitaría el crecimiento del tumor S13, ya que el tratamiento prolongado con un inhibidor de la síntesis de NO disminuye la progresión tumoral, asociada a una disminución de la angiogénesis y a una mayor actividad citotóxica de las células ganglionares.

33. Efecto del tratamiento combinado con un bloqueante de canales de Ca2+ y el inhibidor sintético del uPA B428 sobre la motilidad in vitro y la capacidad metastásica del carcinoma F3II. EF Farías, Laura Todaro, Virginia Ladeda, Elisa Bal de Kier Joffé
Instituto de Oncología Ángel H. Roffo, Facultad de Medicina, UBA

Se demostró que la sobreexpresión de uroquinasa (uPA) en células tumorales es regulada por vías Ca2+-dependientes y que el bloqueo del ingreso de Ca2+ extracelular por el verapamilo (V) inhibe la capacidad invasiva y metastásica. La inhibición catalítica del uPA mediante el B428 (B) reduce la invasividad tumoral local pero no la capacidad metastásica. Se evalúa aquí si la combinación de V y B aumenta su efecto antimetastásico. Se observó inhibición de la migración de las células F3II con V 50µM (47.7%), B 15µM (43.1%) y V 25µM/B 7.5µM (50%) respecto del control. También se redujo el nº de células en spreading (nº cél/campo): C: 45±7.8; V: 35±9.5*; B: 37±7.2*; V/B: 31±8.6* (*p<0.01).La actividad uPA (UI/mg prot.) fue menor (*p<0.001): C: 2±0.6; V: 1.19±0.08*; B: 0.29±0.02*; V/B: 0.37±0.09*. Sólo el tratamiento combinado [V (171µg/ratón/día)/B (500µg/ratón/día)] de ratones inoculados sc o iv con células F3II disminuyó la incidencia (C 100%;V/B 60%) y el nº de metástasis espontáneas (Md (rango):C: 9 (2-18); V/B: 3 (0-13)* (*p<0.05)) y experimentales (C: 37.5 (2-224); V/B: 4.5 (0-210)* (*p<0.01)) respecto del control. La combinación de dos drogas con diferente mecanismo de acción antiproteásico no aumentó la inhibición de V o B in vitro, en las dosis utilizadas, pero mejoró el efecto antimetastásico in vivo.

34. Inhibición de metástasis pulmonares de un tumor por transferencia de suero de ratones portadores de otro tumor. PD di Gianni, OD Bustuoabad, M Franco, G Dran, RA Ruggiero
Instituto de Investigaciones Hematológicas, Academia Nacional de Medicina, Buenos Aires

Demostramos que ratones BALB/c portadores de un tumor primario LB inhibían el desarrollo de un segundo tumor. El carcinoma C7HI no generaba esta inhibición pero su desarrollo metastásico era inhibido por la presencia del tumor LB. Demostramos que la capacidad de inhibir un tumor secundario estaba asociada factores séricos de bajo peso molecular (MW) que inhibían in vitro la proliferación tumoral. En este trabajo estudiamos el efecto de estos factores séricos in vivo. Para ello, ratones portadores de un tumor s.c. C7HI de 55 días recibieron diariamente durante 14 días un inóculo e.v. de: a) suero LB (n=6), b) fracción de bajo peso molecular (1000D) del suero LB (n=5) c) fracción de alto MW del suero LB (n=6), d) suero normal (n=5) y e) nada (n=8). Macroscópicamente, el número de metástasis pulmonares fue (media y rango): a) 62.2 [6-145] (p<0.05), b) 59.6[26-95] p<0.05; c)123.8 [44-208], d) 136.0 [33-277] y e) 103.1 [31-218] ( test U de Mann Whitney). Resultados similares fueron obtenidos en el conteo de metástasis microscópicas, donde la inhibición estuvo asociada a una disminución en el número de células en mitosis y a la inducción de apoptosis. Los resultados demuestran que es posible transferir actividad antimetastásica por inoculación de suero LB y fracciones de suero LB de bajo peso molecular (pero no por la fracción de alto peso molecular) y que actuaría a través de un mecanismo antiproliferativo y de muerte celular.